一种简单快速的miRNA检测新方法

　　PCR和Northernblot是目前检测单个miRNA最广泛使用的两种方法。PCR方法敏感性高，但假阳性的忧虑和引物设计的困难限制了它的使用。Northernblot是非常有效的检测工具，但传统的固相杂交技术程序复杂、时间漫长且操作不便。新出现的液相杂交技术检测速度快，但需要特定的荧光信号检测 仪器 。

　　方法改进：我们这里报道一种新的miRNA检测方法：液相杂交显色法（LHCD）。

　　这种方法是将提取纯化的小RNA与5’端生物素标记的DNA探针进行液相杂交，接着用核酸外切酶消化多余的探针，再将杂交液点于尼龙膜上，之后ABC孵育，最后BCIP/NBP、DAB或者ECL显色。

　　LHCD能够区别miRNA家族成员间一个碱基的差异，其灵敏度可以达到2.5fmol，全过程耗时不到3个小时。本方法由于整合了快速液相杂交和亲和素-生物素信号放大系统（ABC）两大技术，不但实现了miRNA的简单、快速、高灵敏度检测，其可视化的信号目测，还省去了昂贵的信号检测仪。此外，本方法简单的操作流程，使其容易学习和方便使用。