- 易迪拓培训,专注于微波、射频、天线设计工程师的培养
r射线与电磁辐射联合对白血病细胞
录入:edatop.com 点击:
摘要 采用了细胞计数、细胞形态学、流式细胞仪分析方法,用 cB照射源.剂量4Gy,磁场强度10MT,频率250Hz照射人早幼粒白血病细胞(HL一60细),研究了 射线与电磁辐射联合对白血病细胞的作用。结果表明,单独 射线和单独磁场照射均能不同程度地杀伤HL一60细胞,但 射线与电磁辐射联合作用杀伤HL一60细胞能力更强。电磁场能增加 射线杀伤HL一60细胞是通过增加 射线诱导HL一60细胞凋亡的发生。
射线。电磁辐射.细胞凋亡.HL一60细胞 应用电磁场杀伤恶性肿瘤是近年来备受关注的一个课题。人们用各种不同的磁场和强度来研究磁场对恶性肿瘤的作用 。但绝大多数作者是研究单独磁场对肿瘤细胞的杀伤作用 ,电磁场与电离辐射联合对肿瘤细胞的作用研究国内外报道很少。本工作应用新研制的MRZ型电磁辐射仪研究了电磁场与电离辐射联合对白血病细胞的作用,并探讨其作用和机理,为将来应用于临床提供依据。
1 材料和方法
1.1 细胞培养
采用RPMI1640培养基加10%小牛血清,37℃ ,5% CO 条件下培养HL一6o细胞,将对数生长期细胞以等量2 x10 细胞数分别接种到16瓶50mL培养瓶内,随机分成4组,每组4瓶,分别为对照组、磁场组、 射线组、磁场加 射线组。
1.2 照射条件
第1天将细胞置于磁场强度为10MT、频率为250Hz条件下照射2h,第2天细胞经” cs射线(剂量率为90、18cGy/min)照射4Gy后,再经磁场照射2h,第3天磁场再照射2h。
1.3 台盼蓝活细胞染色
用0.4%台盼蓝与等体积细胞悬液混合后,分别置普通光镜下观察,确定死亡细胞数。
1.4 细胞形态学检测
取细胞经离心涂片机甩片后瑞氏染色,镜下观察凋亡细胞形态及凋亡小体。
1.5 流式细胞仪检测
取不同条件照射后的细胞,离心去掉培养液,0.01Mol PBS冲洗2次,加入0.01%RNA酶溶液lO0uL,37℃ 水浴30mln。应用FCM—EPICS型流式细胞仪,用Cellfit软件收集细胞,并分析数据,每个样品收集1 x 10 个细胞。
2 结果
2.1 HL一6o细胞数■变化
采用台盼蓝拒染法对磁场照射后第5天细胞进行存活计数,结果见表1。
由表1可见, 射线加磁场组细胞死亡率为78.87%,明显高于其它3组,而活细胞数为1O.3 x 10 ·mL~.明显低于其它3组。经统计学处理, 射线加磁场组细胞死亡率与单独射线组和单独磁场组相比差异均显著(P700)this.width=700;" >
2.3 HI,一60细胞DNA舍■分析
细胞经磁场照射后第3天,磁场组、 射线组或磁场加 射线组细胞DNA直方图上 /G.峰前均出现细胞凋亡时特有的低宽亚二倍体DNA波峰,既为程序化死亡细胞峰。从出现的百分率上看,磁场加 射线组凋亡细胞为33.36%,明显高于单独r 射线(18.65%)和单独磁场单独磁场组(9.84%)
射线。电磁辐射.细胞凋亡.HL一60细胞 应用电磁场杀伤恶性肿瘤是近年来备受关注的一个课题。人们用各种不同的磁场和强度来研究磁场对恶性肿瘤的作用 。但绝大多数作者是研究单独磁场对肿瘤细胞的杀伤作用 ,电磁场与电离辐射联合对肿瘤细胞的作用研究国内外报道很少。本工作应用新研制的MRZ型电磁辐射仪研究了电磁场与电离辐射联合对白血病细胞的作用,并探讨其作用和机理,为将来应用于临床提供依据。
1 材料和方法
1.1 细胞培养
采用RPMI1640培养基加10%小牛血清,37℃ ,5% CO 条件下培养HL一6o细胞,将对数生长期细胞以等量2 x10 细胞数分别接种到16瓶50mL培养瓶内,随机分成4组,每组4瓶,分别为对照组、磁场组、 射线组、磁场加 射线组。
1.2 照射条件
第1天将细胞置于磁场强度为10MT、频率为250Hz条件下照射2h,第2天细胞经” cs射线(剂量率为90、18cGy/min)照射4Gy后,再经磁场照射2h,第3天磁场再照射2h。
1.3 台盼蓝活细胞染色
用0.4%台盼蓝与等体积细胞悬液混合后,分别置普通光镜下观察,确定死亡细胞数。
1.4 细胞形态学检测
取细胞经离心涂片机甩片后瑞氏染色,镜下观察凋亡细胞形态及凋亡小体。
1.5 流式细胞仪检测
取不同条件照射后的细胞,离心去掉培养液,0.01Mol PBS冲洗2次,加入0.01%RNA酶溶液lO0uL,37℃ 水浴30mln。应用FCM—EPICS型流式细胞仪,用Cellfit软件收集细胞,并分析数据,每个样品收集1 x 10 个细胞。
2 结果
2.1 HL一6o细胞数■变化
采用台盼蓝拒染法对磁场照射后第5天细胞进行存活计数,结果见表1。
由表1可见, 射线加磁场组细胞死亡率为78.87%,明显高于其它3组,而活细胞数为1O.3 x 10 ·mL~.明显低于其它3组。经统计学处理, 射线加磁场组细胞死亡率与单独射线组和单独磁场组相比差异均显著(P700)this.width=700;" >
2.3 HI,一60细胞DNA舍■分析
细胞经磁场照射后第3天,磁场组、 射线组或磁场加 射线组细胞DNA直方图上 /G.峰前均出现细胞凋亡时特有的低宽亚二倍体DNA波峰,既为程序化死亡细胞峰。从出现的百分率上看,磁场加 射线组凋亡细胞为33.36%,明显高于单独r 射线(18.65%)和单独磁场单独磁场组(9.84%)
EMC电磁兼容设计培训套装,视频教程,让您系统学习EMC知识...